1、外植體
外植體類(lèi)型對植物的組織培養工作有著(zhù)明顯的影響作用,是控制組培有效性的重要因素條件。在理論內容上,植物中的各個(gè)組織器官,都可以在組織培養技術(shù)的支撐下完成生長(cháng)發(fā)育。但在大量的研究數據中,木本植物的不同外植體提取部位,與其整體植株的發(fā)育階段有著(zhù)明顯的關(guān)聯(lián)性,會(huì )在不同的生長(cháng)發(fā)育時(shí)期,展現出差異化的特征表現。在對木本植物的外植體進(jìn)行采集的過(guò)程中,需根據具體的組織培養目標、快繁方法、生物習性特征,對其外植體的類(lèi)型進(jìn)行選擇。通常情況下,在木本觀(guān)賞植物的外植體選擇中,都會(huì )定位那些幼嫩的植物組織與器官,并在莖尖、嫩芽、幼葉、胚、子葉等結構的采集中,保證技術(shù)應用外植體的合理性使用狀態(tài)。同時(shí),針對一些特殊性的需求內容,也會(huì )對植物的莖段、成熟葉片、根、花等具體器官進(jìn)行外植體采集。
例如,在對木本觀(guān)賞植物莖段與幼芽進(jìn)行誘導愈傷試驗的處理過(guò)程中,可以在相同培養條件下形成對比分析。實(shí)際處理中,將幼芽作為外植體材料進(jìn)行愈傷處理,表現出較高的誘導率水平,并在快速生長(cháng)的愈傷組織中,明顯的優(yōu)于植物莖段結構的愈傷組織生成。
另外,將蘋(píng)果作為具體的實(shí)驗對比組,可以對其植株葉片進(jìn)行培養處理,并由此分析不同葉子生長(cháng)技術(shù)要素。實(shí)驗發(fā)現,相同條件的植物組織生長(cháng)培養,葉梢位置的幼葉,有明顯的再生能力優(yōu)勢;而在獨立葉片中,葉片中部的組織結構,有更強的生長(cháng)能力,并在葉片接近葉柄的位置,有較快的愈傷組織發(fā)展能力。
2、培養基
培養基是植物組織培養過(guò)程中的基礎物質(zhì),是為被培養組織提供營(yíng)養物質(zhì)的基本條件,不同培養基組成,對植物生長(cháng)有著(zhù)明顯的影響效果。在大多數植物組織的培養中,通常會(huì )在培養基中加入無(wú)機營(yíng)養物質(zhì)、有機添加物、碳源、植物生長(cháng)調節劑、凝膠凝劑等材料。
不同類(lèi)型的植物,或是外植體材料,在培養基適應能力上,也表現出明顯的差異性。在B5培養基中,莖段愈傷組織的誘導率,要明顯地優(yōu)于葉片;而在MS培養基中,這種優(yōu)勢條件就會(huì )發(fā)生互換,使葉片的誘導率高于莖段。
在對組織培養工作進(jìn)行控制的過(guò)程中,會(huì )針對不同的需要條件,對組織培養的階段與目標進(jìn)行調整,在這一變化條件下,也會(huì )使培養基的基本成分發(fā)生變化。例如,在對毛葉棗進(jìn)行組織培養的過(guò)程中,對于驅動(dòng)與增殖階段,可以使用MS培養基,但需要在生根階段的培養中,將MS培養基縮減到50%的程度,才可以更好地完成制作培養。又如,在誘導銀杏莖段愈合的處理中,也可以應用MS培養基,并將50%MS培養基應用在分化芽階段,對于根部誘導與生成,則將培養基更換為White,以此保證整體培養流程的效率化條件。
3、激素
植物組培中,外源物質(zhì)激素中種類(lèi)、質(zhì)量、配比是影響技術(shù)應用條件的重要因素。在類(lèi)型選擇上,植物生長(cháng)素、細胞分裂素、赤霉素、乙烯、脫落酸等常規的植物激素,都可以作為有效的應用條件,對植物的組織生長(cháng)起到一定的刺激作用。同時(shí),也可以應用到油菜素甾體等物質(zhì),對植物組培進(jìn)行調節。
木本觀(guān)賞植物的組織培養中,6-BA、ZT、KT、TDZ等物質(zhì),都是常見(jiàn)的細胞分裂素類(lèi)激素。在此類(lèi)的激素類(lèi)物質(zhì)的刺激作用下,植物組織在組培過(guò)程中,會(huì )在分化與增殖的過(guò)程中,表現出明顯的優(yōu)化效果。以應用最為廣泛的6-BA為例,在對野生荔枝種子進(jìn)行組織培育的過(guò)程中,在其培養基材料中,可以發(fā)現濃度高達20mg/L的6-BA激素物質(zhì),證明了此類(lèi)激素對于分裂的影響作用。而相同類(lèi)型的激素物質(zhì),也存在一定的差異性,以6-BA與KT為例,6-BA可以有效的促進(jìn)細胞的分裂狀態(tài),并在愈傷組織的形態(tài)建成中,起到了積極的作用。而KT對于愈傷組織則沒(méi)有明顯的影響條件,但將其添加到誘導培養基中后,可以對愈傷組織的生成質(zhì)量起到改善與優(yōu)化作用。
4、其他添加物
木本觀(guān)賞植物的組織培養處理中,必要時(shí)可以加入有機物質(zhì),作為外源添加物,以此提高組培的有效性。而對于椰子乳、谷氨酰胺、活性炭、青霉素、核黃素等添加物的使用,已經(jīng)成為了此類(lèi)組培處理中的常態(tài)化技術(shù)。在實(shí)務(wù)操作中,為了對幼苗的生長(cháng)進(jìn)行強化,可以在其培養過(guò)程中,向培養基中加入適當的赤霉素;而在向培養基中添加活性炭之后,可以提高生根苗的生長(cháng)質(zhì)量。因此,不同狀態(tài)類(lèi)型的添加物質(zhì),會(huì )對植物的組織培養條件起到差異的積極影響作用。
5、培養環(huán)境
培養環(huán)境,由光照、溫度、濕度、時(shí)間、繼代次數等多種條件組成,對木本植物的組織培養工作,產(chǎn)生著(zhù)不同條件的影響效果。例如,在對赤桉葉片進(jìn)行不定芽誘導組織培養的過(guò)程中,可以先進(jìn)行10d的暗環(huán)境培養,然后再進(jìn)行每天16h的光暗交替培養。在這一交替條件下的培養效果,要明顯的優(yōu)于全光環(huán)境中的不定芽誘導,而在暗培養過(guò)程中,隨著(zhù)時(shí)間的延長(cháng),會(huì )愈發(fā)縮減不定芽的誘導概率。由此,也體現出了光照條件下,培養環(huán)境對于組織培養有效性的影響。
而從溫度條件出發(fā),在不同的溫度環(huán)境中,也會(huì )對組織培養的效果造成影響。甚至在光、暗協(xié)調配合下的溫度周期,也會(huì )對整體組織培養工作造成影響。在此項技術(shù)理論的影響下,說(shuō)明了培養環(huán)境各項影響因素的綜合性,并非獨立數據下的個(gè)體影響表現,在各個(gè)影響要素之間,也存在著(zhù)相應的關(guān)聯(lián)性條件,最終匯聚在對于植物組織培養的影響效果中。
綜上,木本觀(guān)賞植物的組織培養,是優(yōu)化組培技術(shù)應用空間的重要條件,也是補充木本觀(guān)賞植物應用空間的有效技術(shù)手段。通過(guò)對其基本技術(shù)理論內容與應用價(jià)值的介紹,在影響內容中,說(shuō)明此項技術(shù)的應用條件,可以形成完整的技術(shù)指導條件,為整體技術(shù)的發(fā)展與應用提供基礎性成長(cháng)動(dòng)力。
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